가장흔하게사용되는되는마토그래피은가스크로크로마토그래피또는액체크로토그래피그래피두유형의차이점은컬럼크로마토그래피내이동상의물리적상태와관련되어있습니다。가스크로마토그래피의이동상은고체고정상을샘플을이동시키는가스이지만,액체크로크로토그래피의이동상은입니다。이에따라달라집니다으로의차차차차차에서모드라모드라작용공정은에서모드라의알려져작용작용은분리모드라고있는있는은은분리모드라모드라모드라공정공정분리분리분리분리공정크로크로마토그래피분리방법의모드는액체크로마토그래피기법유형을결정(표1)。
표1.액체액체크로마마의의
액체액체크로마토그래피의유형 | 크로크로마토그래피분리분리모드의: |
흡착크로마토그래피(정상및역상크로마토그래피) | 극성 |
친화성크로마토그래피 | 특정결합상호작용 |
크기배제크로마토그래피 | 분자크기 |
이온교환교환크로마 | 전하 |
크로크로마토그래피정제워크플로우
흡착컬럼크로마토그래피는약물,화학물질,향미및기타물질에대한일반적인분리및정제워크플로우의가장중요한부분입니다。먼저물질을화학적으로합성하거나식물,박테리아또는기타생물로부터추출합니다。물질을농축하여분리정제처리를
간소화하기위해증발이사용용。샘플이새롭고익숙하지않은경우,일반적으로는박층크로마(tlc)또는또는용고압액체크로마(hplc)분석법분석법활용하여최적의마토그래피조건을찾기위한토그래피분리을을위한스크리닝수행합니다。00분취단계에서는플래시크로마토그래피,분취HPLC,또는이둘을결합한방식을사용하여목표화합물이다량으로정제됩니다。해당기법들을함께사용한경우,최종고순도를달성할수있도록플래시크로마토그래피를사전정제단계및분취HPLC에적용합니다。00이시점에서는융점분석,분석용hplc,효소효소사등다른기법사용하여화합물순도와기능을분석준비준비준비기능기능을준비준비준비준비。
합성또는추출이후의의전체워크플로우는그림그림그림나와있습니다
그림1.일반일반추출또는또는합성워크플로우의정제워크워크
흡착컬럼크로마토그래피는액체크로마토그래피의최초형태로,100년도전에러시아계이탈리아인식물학자米克哈尔·茨维에의해발견되었으며,그는이크로마토그래피공정유형을사용하여식물의색소를분리했습니다。이후크로크로마토그래피기법기법은빠르게발전하여합성및추출에서필수적사용하는분석법이되었습니다。
흡착크로마토그래피의경우,분리는샘플성분과고정상및이동상간의상호작용에따라좌우됩니다。다른화학적특성(극성)친화성은분자의2가지특성인흡착과탈착의영향을받습니다。흡착은특정성분이고정상에들러붙는능력을의미합니다。탈착(또는용해성)은혼합물의성분이이동상에서녹는정도를의미합니다。개별샘플성분이고정상을통과해이동하는하는속도는그림
그림2.흡착대탈착
플래시크로마토그래피대분취hplc기법
고압을활용한첫간행물은1970年년대말에플래시크로마토그래피라는분석법과함께등장했습니다。이뿐만아니라분석용HPLC시스템의크기를늘려이시스템을을분취크로마(분취HPLC)에도사용할할수있도록있도록。오늘날두기법은흔하게사용되고있으나,각각각각목표는서로,플래시플래시마토그래피대용량샘플샘플적절한으로정제사전정제로서주로사용되는되는,hplc의목표보다적은용량용량하에분해능(순도)을얻는것입니다。
따라서두크로마토그래피기법은표2에나와있듯이고정상에사용하는물질(다른입자크기),카트리지또는컬럼의크기(내부직경(ID)및길이)그리고이동상의유속이서로다릅니다。
표2.플래시크로마토그래피와분취HPLC간의차이
플래시크로마토그래피 |
분취HPLC. |
|
---|---|---|
입자크기 |
15 - 63μm |
5 - 15μm |
컬럼내경(ID) |
12 - 115毫米 |
10 - 70毫米 |
유속 |
15 - 250毫升/分钟 |
5 - 100毫升/分钟 |
로딩용량 |
<300克 |
<10 G. |
최대압력 |
50岁 |
300岁 |