โครมาโทกราฟี
เทคนิคการทำโครมาโตกราฟีประเภทต่างๆ
กับกับการทำอนุภาคของสารในระหว่างสองเฟสคือเฟสหยุดนิ่งพื้นผิวผิวขนาดใหญ่ใหญ่และที่เคลื่อนเคลื่อนผ่านเฟสหยุดเฟสหยุด
โครมาโตกราฟีประเภทที่ใช้กันบ่อยมากที่สุดได้แก่การทำโครมาโตกราฟีก๊าซและของเหลวความแตกต่างอยู่ที่สภาวะทางกายภาพของเฟสเคลื่อนที่ในคอลัมน์ของโครมาโตกราฟีสำหรับโครมาโตกราฟีแบบก๊าซเฟสเคลื่อนที่หมายถึงก๊าซที่นำพาตัวอย่างผ่านเฟสหยุดนิ่งของแข็งที่ซึ่งโครมาโตกราฟีแบบของเหลวในเฟสเคลื่อนที่จะเป็นสารละลายปฏิกิริยาของสารประกอบกับเฟสหยุดนิ่งคือกระบวนการที่รู้จักในโหมดของการแยกซึ่งมีการควบคุมโดยความแตกต่างของสภาพขั้วขนาดหรือสัมพรรคภาพพันธะจำเพาะต่างๆโหมดวิธีโครมาโตกราฟีในการคัดแยกที่กำหนดประเภทของเทคนิคการโครมาโตกราฟีแบบของเหลว(ตารางที่1)
ตารางที่1ประเภทโครมีโตกราฟีแบบของเหลว
ประเภทโครมีโตกราฟีแบบของเหลว | โหมดโหมดการทำโครโครมาโตกราฟีคัดแยกนั้นขึ้นอยู่: |
โครมาโตกราฟีดูดซับ(โครมาโตกราฟีแบบปกติและแบบเฟสย้อนกลับ) | สภาพขั้ว |
โครมาโตกราฟีสัมพรรคภาพ | ปฏิกิริยาจับพันธะจำเพาะ |
โครมาโตกราฟีในการคัดแยกขนาด | ขนาดโมเลกุล |
โครมาโตกราฟีในการแลกเปลี่ยนไอออน | ประจุ |
ขั้นตอนขั้นตอนการทำให้ให้บริสุทธิ์ด้วยมามา
�จะจะเป็นการทำโครมามาด้วยชั้น(薄层色谱 - TLC)หรือหรือโครมาโตกราฟีของเหลวแรงดันเพื่อการ(高压液相色谱 - HPLC)เมื่อได้สภาวะที่เหมาะสม准备HPLC,หรือใช้ร่วมกันทั้งสองหากใช้เทคนิคทั้งสองร่วมจะใช้มาโตกราฟีเพื่อเตรียมพร้อมก่อนทำให้บริสุทธิ์ใช้ใช้ใช้การให้และใช้ใช้ใช้ใช้เพื่อให้บริสุทธิ์บริสุทธิ์ขั้นสุดสูงตาม
�,การการhplcเชิงเชิง,การวิเคราะห์เอนไซม์และอื่นๆอีกมากมาย
ขั้นตอนขั้นตอนการทำงานทั้งหมดทั้งหมดจากสังเคราะห์หรือแยกสกัดจะแสดงไว้ในภาพที่
ภาพที่1ขั้นตอนการทำให้ในขั้นตอนการแยกสกัดหรือทั่วทั่ว
ต่างๆ
สำหรับโครมาโตกราฟีดูดซับการแยกสารเกิดจากอันตรกิริยาขององค์ประกอบตัวอย่างกับเฟสหยุดนิ่งและเฟสเคลื่อนที่สารประกอบที่มีคุณสมบัติทางเคมีที่ต่างกัน(ความมีขั้ว)จะแสดงสัมพรรคภาพหรือความแข็งแรงในการยึดเกาะที่ต่างกันไปในเฟสเคลื่อนที่และเฟสหยุดนิ่งสัมพรรคภาพจะมีผลจากคุณสมบัติทางเคมีสองประการคือการดูดซับและการปล่อยการดูดซับหมายถึงความสามารถที่องค์ประกอบบางอย่างจะยึดเกาะอยู่กับเฟสหยุดนิ่งการปล่อยหรือความสามารถในการทำละลายจะอธิบายถึงความสามารถที่องค์ประกอบของสารผสมละลายได้ในเฟสเคลื่อนที่สำหรับความเร็วที่องค์ประกอบตัวอย่างแต่ละชนิดจะเคลื่อนผ่านเฟสหยุดนิ่งนั้นขึ้นอยู่กับคุณสมบัติในการดูดซับ/ปล่อยดังที่แสดงไว้ในภาพที่2
ภาพที่2:การการดูดซับเทียบเทียบกับการความ
แฟลชโครมาโตกราฟีเทียบกับเทคนิค高效液相色谱
ทำให้ใช้ได้ในการทำมามาโตกราฟีเพื่อตัวอย่าง(prep hplc)
ดังนั้นเทคนิคโครมาโตกราฟีทั้งสองจึงแตกต่างกันในวัสดุที่ใช้สำหรับเฟสหยุดนิ่ง(ขนาดอนุภาคต่างกัน)ซึ่งขนาดของตลับหรือคอลัมน์(เส้นผ่านศูนย์กลางภายใน(内部直径- ID)และความยาว)รวมถึงอัตราการไหลในเฟสเคลื่อนที่ดังที่แสดงในตารางที่2
ตารางที่2ความแตกต่างระหว่างแฟลชโครมาและและและ制备高清
แฟลชโครมาโตกราฟี |
准备高效液相色谱 |
|
---|---|---|
ขนาดอนุภาค |
15 - 63µm |
5 - 15µm |
idคอลัมน์ |
12 - 115毫米 |
10 - 70毫米 |
อัตราการไหล |
15 - 250毫升/分钟 |
5 - 100ml /min |
ความจุโหลด |
<300克 |
<10 G. |
แรงดันสูงสุด |
50บาร์ |
300岁 |